Perbandingan teknik enzym linked immunosorbent assay dan dot immunobinding assay untuk mendeteksi tobacco mosaic virus, cucumber mosaic visus dan chili vein mottle virus

Abstract

Deteksi yang tepat terhadap penyebab penyakit tumbuhan merupakan salah satu faktor yang menentukan keberhasilan sebuah strategi pengendalian. Teknik serologi merupakan metode yang banyak digunakan untuk mendeteksi virus. ELISA dan DIBA adalah metode yang paling luas penggunaannya pada deteksi serologi virus tanaman. Penelitian ini bertujuan membandingkan sensitivitas metode serologi (ELISA dan DIBA) dalam pengujian TMV, CMV, dan ChiVMV yang berasal dari daun segar dan kering. Metode ELISA yang digunakan dalam penelitian adalah Double-antibodi Sandwich ELISA dengan enzim substrat p-nitrophenyl phosphate sedangkan metode DIBA dilakukan dengan menggunakan membran nitroselulosa dengan enzim substrat Bromo Chloro Indolyl Phosphate. Pengenceran sampel daun dilakukan untuk mengetahui sensitivitas dengan faktor pengenceran 10 sampai dengan 106. Metode DAS ELISA memiliki sensitivitas yang lebih tinggi daripada DIBA untuk mendeteksi TMV dan ChiVMV yang berasal dari daun segar dan kering sedangkan untuk mendeteksi CMV dari dua sumber virus kedua teknik tersebut memiliki senstivitas yang sama. DAS ELISA dapat mendeteksi TMV sampai faktor pengenceran 10 sedangkan DIBA hanya berhasil mendeteksi virus sampai faktor pengenceran 102. DAS ELISA untuk ChiVMV dapat terdeteksi sampai faktor pengenceran 10-2 sedangkan DIBA hanya berhasil mendeteksi sampai 10. Baik DAS ELISA maupun DIBA hanya berhasil mendeteksi CMV sampai faktor pengenceran 10¹.