Mutasi acak dengan acridine orange terhadap bakteri agrobacterium sp yang potensial memproduksi B-(1,3)-glukan

Abstract

Mutagenesis terhadap bakteri dapat digunakan untuk meningkatkan aktivitas bakteri dalam menghasilkan suatu produk. Dalam teknik mutagenesis banyak digunakan senyawa kimia yang urnumnya bersifat toksik, contohnya adalah acridine orange. Penggunaan acridine orange sebagai mutagen dalam dosis yang tinggi dapat rnenyebabkan kematian suatu populasi bakteri namun dalam kondisi terkontrol dapat menghasilkan mutan yang berproduktifitas tinggi. Penelitian yang dilakukan bertujuan untuk mendapatkan isolat mutan bakteri Agrobacterium sp. yang potensial untuk menghasilkan p - (I ,3)-glukan yang lebih tinggi dari tipe liarnya. Besarnya kadar P - (1,3)-glukan yang dihasilkan oleh mutan dibandingkan terhadap p - (1,3)-glukan yang dihasilkan oleh tipe liar dengan nienggunakan analisis· kimia. Senyawa yang dibandingkan adalah konsentrasi glukosa, dan sebagai data pendukung dilakukan analisis terhadap kandungan xilosa, asam glukoronat dan protein. Bakteri Agrobacterium sp. Bro-121 yang digunakan adalah bakteri yang diisolasi dari tumor tanaman brokoli dari alam dalam medium sintetik hingga didapatkan isolat yang murni. Sedangkan sebagai pembanding digunakan bakteri Agrobacterium radiobacter IFO 12665 Al.5 yang merupakan bakteri unggul dan komersil memproduksi p - (1,3)-glukan. Mutan Agrobacterium sp. yang dihasilkan memiliki morfologi yang berbeda dan mampu memproduksi P-(1,3)-glukan lebih tinggi dari tipe liamya. Analisis kadar glukosa dilakukan terhadap !)-(1,3)-glukan dan fraksi hasil purifikasi dengan kolom DEAE sepharose dan kolom sep/wdex.