Kinetika selulolitik isolat khamir dari tanah Gunung Halimun, jawa Barat

Abstract

Khamir lebih dikenal sebagai jenis cendawan bersel satu, merupakan kelompok mikrob yang jarang diselidiki. Khamir menghasilkan enzim untuk membantu proses-proses reaksi dalam tubuhnya, di antaranya selulase. Enzim selulase menghidrolisis selulosa menjadi glukosa yang digunakan sebagai sumber energi. Penelitian ini menguji aktivitas selulolitik tiga isolat khamir yang berasal dari tanah Gunung Halimun, Jawa Barat. Pengukuran enzim menggunakan substrat selulosa tersubtitusi, yaitu karboksimetil selulosa (CMC). Tiga isolat khamir, isolat 7, 9, 24 merupakan khamir yang memiliki aktivitas CMC-ase. Dari ketiga isolat yang diinkubasi pada media pertumbuhan cytophage, hanya isolat 24 yang menunjukkan pertumbuhan baik dalam media pertumbuhan, kondisi stabil, serta memiliki aktivitas CMC-ase tertinggi, yaitu 0.2537 Unit. Aktivitas tertinggi isolat 7 dan 9 masing-masing 0.0194 U dan 0.0238 U. Parameter kinetika yang ditentukan terhadap isolat 24 meliputi uji kinetika pertumbuhan ialah laju pertumbuhan spesifik maksimum (Menaks), dan waktu perlipatan-dua sel (ta). Hasil penelitian menunjukkan bahwa isolat 24 memiliki nilai Hoaks dan td yaitu, 0.1068 jam dan 6.4867 jam. Parameter kinetika yang ditentukan pada uji kinetika reaksi enzim adalah laju reaksi, laju reaksi maksimum (Vmaks), tetapan Michaelis Menten (K), dan tetapan kecepatan reaksi orde pertama (k'). Kinetika reaksi enzim CMC-ase ditentukan berdasarkan pengukuran konsentrasi produk glukosa dengan metode spektrofotometri dengan reagen pewarna asam-3,5-dinitrosalisilat. Enzim CMC-ase dari isolat 24 memiliki nilai Vmaks 1.3594 gLmenit, KM 60.2991gL¹, k' = 0.0225 menit.