Karakterisasi enzim fitase dari Bacillus coagulans

Abstract

Fitase (EC 3.1.3.8) merupakan enzim yang mampu mengkatalisis reaksi hidrolisis asam fitat (mio- inositol heksakisfosfat), sejenis ester fosfat yang dapat mengikat mineral dan protein sehingga sulit diserap tubuh. Pemanfaatan fitase untuk menurunkan kadar asam fitat dalam bahan makanan perlu memperhatikan karakteristik enzim, agar aktifitas enzim berlangsung pada kondisi yang optimal. Fitase yang diproduksi dari Bacillus coagulans diendapkan dengan penambahan amonium sulfat hingga 70 % jenuh dilanjutkan dengan dialisis. Fraksi enzim hasil dialisis kemudian dikarakterisasi. Fraksi dialisis memiliki aktifitas spesifik 0,5676 U/mg protein dengan kemurnian 1,5 kali. Fitase Bacillus coagulans memiliki aktifitas optimum pada suhu 40°C dan pH 6.0. Enzim ini mengalami penurunan aktifitas bila konsentrasi substrat > 0,7 mM. Nilai KM yang diperoleh dari kurva Lineweaver- Burk sebesar 0,562 mM dengan kecepatan maksimum 0,731 µmol PO4/menit/ml. Fitase Bacillus coagulans mengalami penghambatan aktifitas oleh penambahan 1 mM Fe* dan Fe, namun Ca2+, dan Mn** pada konsentrasi yang sama dapat meningkatkan aktifitasnya. Mg2+,