Analisis integrasi Gen MaMt2 pada transgenik putatif Rumput Laut Kappaphycus alvarezii

Abstract

Metallthionein merupakan protein pengikat logam berat dengan membentuk ikatan logam-Cys (Thiolate). Ekspresi gen metallothionein diinduksi oleh beberapa logam berat seperti Cd, Zn, dan Cu, tetapi juga menjadi mediator pada stress fisiologis, termasuk hormon dan Reactive Oxygen Spesies.Complementary DNA (cDNA) gen penyandi protein metallothionein tipe II (gen MaMt2) telah diisolasi dari Melastoma affine D. dan telah ditransformasikan ke talus K.alvarezii dengan bantuan Agrobacterium tumefaciens. Beberapa talus hasil transformasi sudah dilakukan analisis molekular. Namun, masih terdapat 4 talus yang belum dilakukan analisis molekular. Oleh karena itu, penelitian ini bertujuan membuktikan integrasi cDNA gen Metallothinien tipe II (gen MaMt2 ) pada genom rumput laut Kappaphycus alvarezii menggunakan teknik Polymerase Chain Reaction (PCR). Analisis molekuler dilakukan dengan memotong sampel talus putatif (Tp):Tp1, Tp, Tp3, dan Tp4 dari K. alvarezii sepanjang 0,3 cm. DNA genom K. alvarezii diisolasi menggunakan larutan CTAB. Selanjutnya DNA genom hasil isolasi diamplifikasi menggunakan teknik PCR untuk mengetahui integrasi gen MaMt2 beserta promoter Ubiquitin menggunakan primer F-Ubi MaMt2 dengan R-MaMt2 tengah. Hasil PCR menunjukan bahwa gen MaMt2 terintegrasi pada talus Tp2 dan Tp4.