Karakteristik protease beberapa bakteri patogen

Abstract

Tujuan penelitian ini adalah untuk mengkarakterisasi protease dari bakteri patogen yaitu: bakteri Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Klebsiella sp. Staphylococcus epidermidis yang diskrining dari koleksi Rumah Sakit Pertamina Jakarta dan A.hydrophila yang diperoleh dari Departemen Budidaya, Perairan Fakultas Perikanan dan llmu Kelautan Institut Pertanian Bogor. Karakter protease patogen ini penting untuk skrining inhibitor protease. Waktu produksi optimum P.aeruginosa, S.epidermidis dan A.hydrophila adalah 48 jam, sedangkan E.coli, adalah 24 jam, S.aureus dan Klebsiella sp. adalah 16 jam. Pengaruh inhibitor spesifik (pMSF dan EDTA) mengindikasikan protease P.aeruginosa, E.coli, S.aureus, Klebsiella sp., S.epidermidis dan A.hydrophila adalah serin metaloprotease. Berat molekul ditentukan dengan menggunakan SDS-P AGE dan zimogram didapatkan berat molekul sekitar 35 kD untuk protease E.coli, S.aureus, Klebsiella sp., S.epidermidis dan A.hydrophila sedangkan protease P.aeruginosa berat molekulnya adalah 36 kD and 42 kD. Protease P.aeruginosa dimurnikan dengan menggunakan Kromatografi kolom Sephadex G-I00.