Regenerasi dan Transformasi Tebu (Saccharum officinarum L.) Kultivar PA 183 dan CB 6979 dengan Gen Fitase Melalui Agrobacterium tumefaciens GV2260

Abstract

Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mendapatkan komposisi media regenerasi yang paling baik untuk regenerasi kalus tebu nontransforman dan transforman. Tujuan yang lain adalah mengintroduksi gen fitase ke dalam genom tanaman tebu melalui Agrobacterium tumefaciens GV2260. Hasil yang diperoleh dari penelitian ini adalah komposisi media regenerasi yang terbaik untuk menginduksi tunas pada kultivar PA 183 adalah media MS yang ditambah dengan BAP 0.75 mg/L dan kinetin 0.20 mg/L. Media untuk induksi perakaran pada kultivar PA 183 diperoleh pada media MS yang ditambah IBA 0.50 mg/L dan IAA 0.50 mg/L. Komposisi media terbaik untuk menginduksi tunas pada kultivar CB 6979 adalah media MS ditambah dengan BAP 0.50 mg/L dan kinetin 0.40 mg/L. Formasi tunas pada kultivar CB 6979 diinduksi oleh media MS yang ditambah dengan IBA 0.25 mg/L dan IAA 0.50 mg/L. Kalus transforman kultivar PA 183 sebanyak dan 135 kalus transforman kultivar CB 6979 dapat tumbuh pada media seleksi kanamisin. Planlet transforman kultivar PA 183 yang bisa tumbuh pada media regenerasi berjumlah 90 dan kultivar CB 6979 berjumlah 129 sedangkan yang dapat tumbuh setelah diaklimatisasi berjumlah 20 planlet kultivar PA 183 dan 25 planlet kultivar CB 6979. PCR yang dilakukan pada planlet tebu transforman menunjukkan bahwa gen fitase berhasil ditransformasi dan hasil uji aktivitas enzim fitase pada planlet transforman, kultivar PA 183 adalah 0.116 U/ml dan CB 6979 0.123 U/ml.