Pemurnian dan karakterisasi protease dari Bacillus punilus

Abstract

Penelitian ini bertujuan mempelajari sifat-sifat enzim protease ekstraselular dari Bacillus pumilus yang diisolasi dari limbah cair tahu di Indonesia. Galur murni yang digunakan Bacillus pumilus Y1 merupakan hasil isolasi dari Likumahua Yosi T. Maria (1993). Karakteristik enzim protease yang diamati meliputi pengaruh suhu, pH, jenis dan konsentrasi ion logam terhadap aktivitas enzim, param- eter kinetika reaksi ( Km dan Vmax ), dugaan berat molekul, dan tingkat kemurnian yang dapat dicapai setelah pemurnian melalui pengendapan garam, dialisis dan kromatografi. Produksi enzim dilakukan dengan proses fermentasi sistem curah ( batch). Limbah cair tahu sebanyak 800 ml (pH 7), ditambah 5% susu skim digunakan sebagai medium. untuk pertumbuhan Bacillus pumilus. selam 12 jam Fermentasi dilakukan dalam bejana fermentor pada suhu 37° C, dengan agitasi 100 rpm, dengan aerasi 1 VVM dan pH 7. Pemanenan enzim protease dilakukan dengan sentrifugasi pada 2000 rpm selama 20 menit pada suhu 0° C. Supernatan yang dihasilkan disebut ekstrak kasar…dst