Studi pembentukan plb, regenerasi dan transformasi pada anggrek dendrobium sp menggunakan Agrobacterium tumefasciens

Abstract

Penelitian bertujuan untuk mengetahui pengaruh media, hormone dan sukrosa pada pembentukan protocorm- like bodies (plb) anggrek Dendrobium sp serta memperoleh metoda transformasi yang optimum menggunakan Agrobacterium Lumefasciens. Penambahan hormone BAP 1 mg/L dan NAA 0,5 mg/L pada media dasar Knudsons berpengaruh terbaik pada inisiasi terbentuknya plb, sedangkan pemberian sukrosa pada konsentrasi 20 g/L memberikan respon proliferasi plb terbaik. Planlet atau tunas yang lebih baik didapatkan dari media dengan penambahan kombinasi hormon kinetin 1 mg/L dan NAA 2 mg/L. Metode transformasi tanaman pada Dendrobium yang optimum adalah menggunakan metode perendaman pada OD rendah selama 1 jam dan perlu diberikan tambahan acetosyringon 100 µM pada media ko-kultivasi. Putativ transgenik telah diperoleh dengan cara deteksi GUS pada planlet tertransformasi.