Evaluation of ELISA as Detection Method of Maize dwarf mosaic virus in Maize

Abstract

Jagung (Zea mays) merupakan salah satu tanaman pangan utama di Indonesia. Pemasukan benih jagung dari negara lain melalui kegiatan importasi berpotensi membawa patogen yang belum dilaporkan keberadaannya di wilayah NKRI, yaitu patogen yang termasuk organisme pengganggu tanaman karantina golongan A1 (OPTK A1). Salah satu OPTK A1 pada tanaman jagung adalah Maize dwarf mosaic virus (MDMV). Metode yang tepat diperlukan untuk mendeteksi MDMV pada benih jagung sebagai langkah awal mencegah masuk dan tersebarnya virus ini di wilayah Indonesia. Penelitian ini bertujuan mengoptimasi protokol DAS-ELISA dan TAS-ELISA sebagai metode deteksi MDMV pada jagung. Suhu dan waktu inkubasi yang berbeda diuji untuk mendapatkan hasil deteksi terbaik. Berdasarkan nilai absorbansi, protokol DAS-ELISA terbaik didapatkan pada suhu 4 oC, 4 oC, dan 28 oC dengan waktu 16–21 jam, 16–21 jam, dan 2 jam secara berturut-turut untuk inkubasi antibodi, sampel, dan konjugat; sedangkan protokol TAS-ELISA terbaik didapatkan pada suhu 4 oC, 4 oC, 28 oC, dan 28 oC selama 16– 21 jam, 16–21 jam, 2 jam, dan 1 jam secara berturut-turut untuk inkubasi antibodi spesifik, sampel, monoklonal antibodi, dan RAM-AP. Selanjutnya pengujian validasi menggunakan TAS-ELISA dan terbukti bahwa sensitivitas metode tersebut mencapai konsentrasi antibodi 1:1000. TAS-ELISA juga spesifik terhadap MDMV karena tidak reaktif terhadap virus lain. Hasil penelitian ini diharapkan dapat digunakan sebagai rekomendasi terhadap pengembangan protokol metode deteksi MDMV berbasis ELISA.