Karakterisasi dan Aktivitas Inhibitor Lipase Pankreas secara In Vitro dari Aktinobakteri Endofit Rhododendron spp

Abstract

Obesitas menjadi masalah kesehatan global, diantaranya dapat memicu penyakit jantung dan diabetes tipe 2. Konsumsi lemak melalui asupan makanan secara berlebihan tanpa diimbangi dengan aktivitas fisik akan menyebabkan obesitas. Kondisi ini dapat terjadi karena ketidakseimbangan antara energi yang dihasilkan dengan penggunaannya. Masalah obesitas dapat diatasi menggunakan inhibitor lipase pankreas melalui mekanisme kerjanya mengurangi penyerapan lemak dengan menekan aktivitas lipase pankreas. Produsen senyawa bioaktif inhibitor enzim dapat bersumber dari tanaman maupun mikrob. Senyawa bioaktif inhibitor lipase pankreas yang telah dikomersialkan adalah xenical yang berbahan aktif orlistat. Orlistat merupakan derivat dari lipstatin yang pertama kali diproduksi oleh Streptomyces toxytricini. Mikrob endofit seperti aktinobakteri merupakan salah satu mikrob yang menghasilkan senyawa bioaktif yang sama dengan inang. Pemanfaatan senyawa bioaktif aktinobakteri endofit pada Rhododendron spp. berpeluang sebagai inhibitor lipase pankreas. Hal ini didukung oleh kandungan senyawa bioaktif yang dihasilkan Rhododendron spp. diduga potensial sebagai inhibitor lipase pankreas. Aktinobakteri endofit berhasil diisolasi dari Rhododendron spp. dan dilaporkan potensial sebagai antibakteri, namun potensinya sebagai inhibitor lipase pankreas masih belum diketahui. Penelitian ini bertujuan untuk menentukan aktivitas inhibitor lipase pankreas secara in vitro dan mengkarakterisasi isolat terpilih secara makroskopis, mikroskopis serta mengidentifikasi secara molekuler berdasarkan gen 16S rRNA. Penelitian ini menggunakan 23 aktinobakteri endofit Rhododendron spp. koleksi peneliti sebelumnya. Pada uji awal dilakukan penapisan terhadap inhibitor lipase pankreas. Pengujian inhibitor lipase pankreas menggunakan enzim lipase porcine (L3126) dan subtrat p-nitrofenil butirat. Aktivitas inhibitor lipase pankreas diukur menggunakan ELISA reader panjang gelombang pada 400 nm. Ekstrak etil asetat terpilih diuji untuk mendapat nilai IC50 dan mengetahui kandungan fitokimianya. Karakterisasi morfologi dilakukan secara makroskopis pada beberapa medium (ISP2, ISP3, ISP4 YSA) dan analisis molekuler dilakukan berdasarkan gen 16S rRNA. Hasil penapisan 23 supernatan aktinobakteri endofit diperoleh 11 isolat yang mempunyai aktivitas inhibisi lipase pankreas yang bervariasi dengan rentang 0%-91.69%. Sebelas isolat yang mempunyai aktivitas inhibisi empat diantaranya (RZP 1.3, RSSB 3.2, RJB F3.2 dan RSS 2.1) menunjukkan persentase inhibisi >80%, sehingga empat isolat tersebut dilanjutkan pada uji berikutnya. Nilai IC50 terbaik dari empat ekstrak terpilih ditunjukkan oleh isolat RJB F3.2 yakni sebesar 431.48 μg mL-1. Hasil karakterisasi morfologi aktinobakteri bakteri endofit Rhododendron spp. memperlihatkan karakter Streptomyces, hal ini diperkuat oleh hasil identifikasi molekuler gen 16S rRNA. Berdasarkan uji fitokimia ekstrak etil asetat menghasilkan senyawa bioaktif golongan alkaloid, flavonoid, saponin, steroid dan terpenoid. Data penelitian ini menunjukkan bahwa empat aktinobakteri endofit Rhododendron spp. berpotensi sebagai inhibitor lipase pankreas.