Antibodi anti-idiotipe sebagai kandidat vaksin rabies

Abstract

Serum anti rabies (SAR) yang diproduksi pada kuda, disebut antibodi 1 (Ab1) digunakan untuk mengimunisasi ayam. Imunoglobulin ayam (IgY) anti-Ab1 merupakan antibodi anti-idiotipe (Ab2) terhadap rabies, dipanen dari darah ayam setiap minggu selama 10 minggu. Rata-rata titer Ab2 tertinggi diperoleh pada minggu ketiga dan keempat pasca vaksinasi. Pemurnian IgY (Ab2) dilakukan melalui pengendapan dengan amonium sulfat jenuh konsentrasi 60% dan 50%, dilanjutkan dengan dialisis menggunakan PBS pH 8,0 selama 24 jam pada suhu 2 – 8 oC. Pemurnian tahap berikutnya dengan kolom kromatografi afinitas spesifik terhadap IgY, menghasilkan protein dengan berat molekul 185.000, 95.000 dan 49.000 dalton. Sebanyak 3 ekor kelinci New Zealand White diimunisasi dengan Ab2 dan 3 ekor kelinci lainnya sebagai kelompok kontrol. Pemeriksaan serum kelinci (Ab3) dengan teknik Agar Gel Presipitation Test (AGPT), menunjukkan Ab3 bereaksi homolog dengan Ab2 dan virus rabies. Reaksi juga memperlihatkan pola reaksi identitas sebagian (partial identity) antara Ab2 dan virus, menunjukkan bahwa tidak semua dari Ab2 yang terbentuk dari responnya terhadap Ab1 mengandung internal image yang dapat menginduksi antibodi spesifik terhadap antigen aslinya. Pengujian serum terhadap kadar antibodi rabies menunjukkan bahwa Ab2 mampu menginduksi respon antibodi lebih dari 0,5 IU/ml mulai minggu pertama sampai keempat pasca vaksinasi. Kesimpulan dari hasil penelitian ini, yaitu antibodi anti-idiotipe mampu menginduksi tingkat antibodi protektif terhadap virus rabies, sehingga Ab2 dapat digunakan sebagai antigen pengganti dalam imunisasi rabies.

Anti rabies serum (ARS) called antibody 1 (Ab1) was used as the antigen to immunize laying chickens. Anti-Ab1 chicken immunoglobulins (IgY), the antiidiotype antibodies against rabies (Ab2) was isolated from chicken blood every week for ten weeks. The highest titer of Ab2 was found at the third week after the last immunization. Immunoglobulin Y was separated by means of ammonium sulfate precipitation, then dialyzed using PBS pH 8.0 for 24 hours at 2 – 8 oC and purified using affinity chromatography column for IgY lead the proteins molecules with 185,000; 95,000 and 49,000 dalton in weigth. Purified IgY was used to immunize New Zealand White rabbit and the antibody response (Ab3) was detected using Agar Gel Precipitation Test (AGPT). The Ab3 showed specific reaction with Ab2 as well as rabies virus. Interestingly, Ab2 and rabies virus express partial identity reaction. This lead the insight, that not all parts of Ab2 are internal image of rabies virus. The efficacy of Ab3 was detected using enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) and indicated that the level of Ab3 titer is protective according to WHO standard (more than 0.5 IU/ml). The conclusion of this study is the anti-idiotype antibody can induce protective immune response against rabies virus and can be used as an alternative for rabies anti-idiotype vaccine. Key words : anti-idiotype vaccine, antibody, rabies