Pelacakan Perlekatan Bakteri Escherichia Cozi Kg9 Pada Zona Pelusida Embrio Mencit Dengan Metode Enzym Linked Immunosorbent Assay (Elisa) Dan Scanning Electron Microscope (SEM)

Abstract

Tclah dilakukan penelitian laboratoris tentang perlekatan E.coli K99 pada zona pelusida mencit. Sanlpai kini bclurn ada irlforma~mi engcnai pcrlckat an antara E.coli Kg9 dengan zona pelusida yang dilacak rnengg~li~akilErL~T S.4 dnn SEPV1. Kji FT,ISA dipvrsiapkan guns melacnk perlekatan ini. Untuk itu, zona pt!lusid;~ nlcncit dipisal~kan.. ~rtul:th rn~brioI L I L ( C ' ~ ~dIaI n~ sclnnjutnya ciisonikasi. Zona pelusida Fang teliih disonikasi dipandang sabagai antigen dnn digunnkan untuk melnpisi sumuran cawan El ,ISA. Suspcnsi 6 . ~ 0 1 1 dnlnm PBS. buik bnkt.eri yang mcmiliki K99 man pun yang tidak, dipersiapkan dari scl-sel bakteri utuh yang hcrasnl dari isolat yang berbcda, hntigurl pili K99 dipersiapkan dengan pcmanasan suspcnsi E.colz Kg9 pada suhu fiOnC selanla satu jam. Pili K99 dipuroleh dengan melakukan sentrifyus. Embrio yang ~nemilikzi onn pclusiria utuh diccmari dcngar~b akteri E.roli Ii99 scbarlyak 10' per ml, diinkubasikan sclnmn satu jam pitda suhu 3T°C. Se1nnjutn.a urnbrio Fang lercemar itu dicuci dengan mPBS dnn dipersiapk~rnu ntuk pcmeriksaan mikroskop electron. Hasil penelitinn ini menunjukkan bnhwa kepadatan nptik sanlplc-sampol yang nlcngandung antigen K99, angkanya lebih tinggi dibnndingkan dengan yang tidak 1K38 dnn P41). Dalam penelitian ini ditemukan adanya perlukatan antara antigen K99 dungan zuna pclusida pada sumurnn yang dilapisi dengan zona pelusida, dan lidak dengan Kg8 dan F41. Hal iili berarti bahwa terjadi perlukatan antara antigen Kg9 dengan znnn pclusida. Dengan SKM, baktcri E.col? K99 terlacak mulekat pada pern~ukaanem brio. Kcsirnpulan yang dapat ditnrikdari penelitinn ini bahwa t~rjadi perlckatan yangspesifik antara E.coli K99 dengan zona pelusida, yang ditunjukkan antara pili K99 dengan ekstrak znna pelusida. Knta-kai;~ kunci : ELTSA. SEh1, zuna prlusidn, Iq:.coli K99.