Konstruksi Vektor Fusi Gen Penyandi Peptida Sinyal Usp45 dengan Gen Plantarisin F dari Lactobacillus plantarum
View/ Open
Date
2015Author
Affandi, Muhamad Arif
Artika, I Made
Mustopa, Apon Zaenal
Metadata
Show full item recordAbstract
Plantarisin F merupakan bakteriosin yang disandikan lokus plnF pada
Lactobacillus plantarum yang bersifat antimikrob. Ekspresi plantarisin F pada
inang ekspresi lain memerlukan peptida sinyal untuk mengarahkan sekresinya.
Peptida sinyal Usp45 (spusp45) dari Lactococcus lactis adalah peptida sinyal utama
yang digunakan oleh L. lactis untuk mensekresikan protein. Penelitian ini
bertujuan melakukan fusi sekuen gen spusp45 dengan gen plnF, serta kloning pada
vektor ekspresi pNZ8148. Sekuen spusp45 dan plnF diamplifikasi dengan teknik
PCR (Polymerase Chain Reaction). Teknik PCR Overlap Extension digunakan
untuk membuat gen fusi spusp45:plnF. Gen fusi spusp45:plnF yang berukuran 207 pb
disisipkan ke dalam vektor pGEM-T easy menghasilkan vektor
pGEM:spusp45:plnF sedangkan vektor pNZ8148:spusp45:plnF dihasilkan dari
pNZ8148. pGEM:spusp45:plnF diintroduksikan ke dalam Escherichia coli TOP10
sementara pNZ8148:spusp45:plnF diintroduksikan ke dalam inang Escherichia coli
MC1061. Konfirmasi sekuen dengan peruntunan didapatkan adanya penambahan
satu kodon penyandi alanina pada posisi kodon ke-30.
Collections
- UT - Biochemistry [1253]